供应 猪流行性腹泻病毒抗体诊断试剂盒

【包装规格】 96T/盒

【预期用途】 本试剂盒用于检测猪血清、血浆及相关液体样本中猪流行性腹泻病毒抗体（PEDV-Ab）。

【原    理】

   本试剂盒系由预包被猪流行性腹泻病毒（PEDV）抗原的微孔板和酶标记抗原及其他配套试剂组成，应用双抗原夹心酶联免疫法（ELISA）原理检测猪血清、血浆及相关液体样本中流行性腹泻病毒抗体。实验时，在包被板中加入对照血清和待检样本，经温育后，若样品中含有猪流行性腹泻病毒抗体，则将与包被板上抗原结合，经洗涤除去未结合的其他成分后；再加入酶标抗原，与包被板上抗原抗体复合物发生特异性结合；再经洗涤除去未结合的酶结合物，在孔中加TMB底物液，与酶反应形成蓝色产物，显色深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关；加入终止液终止反应后，产物变为黄色；用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值，即可知样品是否含有猪流行性腹泻病毒抗体。

【储存及有效期】

　　于2～8℃避光保存，有效期为6个月。

　　包被板开封后请于2～8℃避光保存，使用期限为1个月。

【样品制备】

1.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。

2.不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

【洗涤液配制】浓缩洗涤液使用前应恢复至室温（25℃左右），并摇动使沉淀的盐溶解，然后用蒸馏水或去离子水作30倍稀释。【试验操作方法】

1.使用前将试剂盒置室温30分钟，恢复至室温。

2.取所需用量包被微孔板条，设空白对照1孔、阴阳性对照各2孔及所需的样品孔并编好号；未用的板条尽快密封，2～8℃保存。

3.阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照50μl；样品孔每孔加入样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl；空白对照孔不加。

4.混匀，置37℃反应30分钟。

5.扣去孔内液体，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，拍干。

6.每孔加酶标记物50μl（空白孔除外）。置37℃反应30分钟。

7.洗涤，同步骤5。

8.每孔依次加显色剂A、显色剂B各50μl，混匀，37℃避光反应10分钟。

9.每孔加终止液50μl，混匀，用空白孔调零，于450nm(630nm作参比波长）测定各孔吸光值（A450）。测定应在终止后15分钟内进行。

【结果判定】

1.阴性对照：正常情况下，阴性对照孔平均A值≤0.1；

2.阳性对照：正常情况下，阳性对照孔平均A值≥1.0；

3.临界值（CUT OFF）计算：临界值=阴性对照孔平均A值+0.15；

4.结果判定：样品A450值大于临界值，判为阳性；样品A450值小于临界值，判为阴性。

【试验方法的局限性】

   该试验仅作为定性检测猪流行性腹泻病毒抗体。