供应 猪衣原体抗体检测试剂盒

【产品名称】

通用名：猪衣原体抗体检测试剂盒（酶联免疫法）

【包装规格】 96T/盒

【预期用途】

本试剂盒用于检测猪血清中猪衣原体抗体，评估猪场猪衣原体疫苗免疫状况。

【原    理】

本试剂盒系由预包被猪衣原体蛋白的微孔板和酶标记二抗及其他配套试剂组成，应用酶联免疫法（ELISA）原理检测猪血清或血浆中猪衣原体特异性抗体。实验时，在包被板中加入对照血清和稀释的待检血清，经温育后，若样品中含有猪衣原体病毒的特异性抗体，则将与包被板上抗原结合，经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后；再加入酶标二抗，与包被板上抗原抗体复合物发生特异性结合；再经洗涤除去未结合的酶结合物，在孔中加TMB底物液，与酶反应形成蓝色产物，显色深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关；加入终止液终止反应后，产物变为黄色；用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值，即可知样品是否含有特异性抗体。

【储存及有效期】

于2～8℃避光保存，有效期为12个月。

包被板开封后请于2～8℃避光保存，使用期限为1个月。

【样品制备】  取动物全血，按常规方法制备血清，要求血清清亮，无溶血、无污染。样品短期可于2～8℃保存，长期需置-20℃保存。

【样品稀释】  用样品稀释液将待检血清按1：100倍稀释（如5μl血清加入495ul样品稀释液中，混匀）。阴、阳性对照不用稀释。

【洗涤液配制】浓缩洗涤液使用前应恢复至室温（25℃左右），并摇动使沉淀的盐溶解，然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释。

【试验操作方法】

1.使用前将试剂盒置室温30分钟，恢复至室温。

2.取所需用量微孔板条，设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔，未用的板条尽快密封，2～8℃保存。

3.空白对照孔加样品稀释液100μl；阴性/阳性对照孔分别加入阴性/阳性对照血清100μl；样品孔每孔加入稀释后的血清样品100μl。

4.混匀，置37℃反应30分钟。

5.扣去孔内液体，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，拍干。

6.每孔加酶标记物100μl（空白孔除外）。置37℃反应30分钟。

7.洗涤，同步骤5。

8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混匀，37℃避光反应10分钟。

9.每孔加终止液50μl，混匀，用空白孔调零，于450nm(630nm作参比波长）测定各孔吸光值（A450）。

【结果判定】

阴性对照呈无色或浅黄色，阳性对照呈明显黄色，表示试验有效。

以空白对照调零，用酶标仪于450nm（630nm作参比波长）读取吸光度（A值）。待检孔A值大于阴性对照A值平均值的2.1倍者判为阳性。如阴性对照A值的平均值低于0.08时按0.08计算。