大鼠补体3aC3a酶联免疫吸附测定试剂盒

大鼠补体片断3a（C3a） ELISA试剂盒    优货供应

【大鼠补体片断3a（C3a） ELISA试剂盒】 的液体类标本：

包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。

1）血清：室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

2）血浆：应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

3）尿液：用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

4）细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/ 分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并 放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5）组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

试剂盒组成：

　　封板膜:2片（48）/2片（96）

　　说明书:1份

　　密封袋:1个

　　标准品： 2700ng/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存

　　酶标包被板: 1×48 1×96 2-8℃保存

　　样品稀释液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存

　　显色剂A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存

　　显色剂B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存

　　终止液: 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存

　　浓缩洗涤液:（20ml×20倍）×1瓶 （20ml×30倍）×1瓶 2-8℃保存

【大鼠补体片断3a（C3a） elisa试剂盒】注意事项：

　　1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

　　2. 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

　　3. 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

　　4. 请每次测定的同时做标准曲线，**好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请**后乘以总稀释倍数（×n×5）。

　　5. 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

　　6. 底物请避光保存。

　　7. 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

　　8. 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

　　9. 本试剂不同批号组分不得混用。

　　10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

实验原理：

本试剂盒应用双抗体夹心法测定 标本 中人单核细胞趋化蛋白2（MCP-2/CCL8）水平。用纯化的人单核细胞趋化蛋白2（MCP-2/CCL8）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入单核细胞趋化蛋白2（MCP-2/CCL8），再与HRP标记的单核细胞趋化蛋白2（MCP-2/CCL8）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成**终的黄色。颜色的深浅和样品中的单核细胞趋化蛋白2（MCP-2/CCL8）呈正相关。用 酶标仪 在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人单核细胞趋化蛋白2（MCP-2/CCL8）浓度。

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