供应 鸡禽流感抗体诊断检测试剂盒
预期用途】 禽流感是由禽流感病毒（Avian Influenza Virus，AIV）引起的一种禽类急性高度致病性传染病。本病以急性败血性死亡到无症状带毒等多种病症为特点，禽类感染后体内会产生特异性抗体。本试剂盒用于检测鸡血清或血浆中禽流感病毒特异性抗体，作为评估鸡禽流感疫苗免疫状况和该病的辅助检测指标。
【原 理】
本试剂盒系由预包被禽流感病毒（AIV）重组抗原的微孔板和酶标记二抗及其他配套试剂组成，应用酶联免疫法（ELISA）原理检测鸡血清或血浆中禽流感病毒特异性抗体。实验时，在包被板中加入对照血清和稀释的待检血清，经温育后，若样品中含有禽流感病毒的特异性抗体，则将与包被板上抗原结合，经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后；再加入酶标二抗，与包被板上抗原抗体复合物发生特异性结合；再经洗涤除去未结合的酶结合物，在孔中加TMB底物液，与酶反应形成蓝色产物，显色深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关；加入终止液终止反应后，产物变为黄色；用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值，即可知样品是否含有特异性抗体。
【样品制备】 取动物全血，按常规方法制备血清，要求血清清亮，无溶血、无污染。样品短期可于2～8℃保存，长期需置-20℃保存。
【样品稀释】 用样品稀释液将待检血清按100倍稀释（如5μl血清加入495μl样品稀释液中，混匀）。阴、阳性对照不用稀释。【洗涤液配制】浓缩洗涤液使用前应恢复至室温（25℃左右），并摇动使沉淀的盐溶解，然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释。【试验操作方法】
1.使用前将试剂盒置室温30分钟，恢复至室温。
2.取所需用量包被微孔板条，设空白、阴性及阳性对照各2孔，未用的板条尽快密封，2～8℃保存。
3.阴性、阳性对照孔分别加入阴性、阳性对照血清100μl；样品孔每孔加入稀释后的血清样本100μl；空白对照孔不加。
4.混匀，置37℃反应30分钟。
5.扣去孔内液体，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，拍干。
6.每孔加酶标记物50μl（空白孔除外）。置37℃反应30分钟。
7.洗涤，同步骤5。
8.每孔依次加显色剂A、显色剂B各50μl，混匀，37℃避光反应10分钟。
9.每孔加终止液50μl，混匀，用空白孔调零，于450nm(630nm作参比波长）测定各孔吸光值（A450）。
【结果判定】
1.阴性对照：正常情况下，阴性对照孔A值≤0.10；
2.阳性对照：正常情况下，阳性对照孔A值≥0.3；
3.结果判定：样品A450值大于0.18，判为阳性；样品A450值小于0.18，判为阴性。
【试验方法的局限性】
该试验仅作为定性检测鸡血清或血浆中禽流感病毒IgG抗体，根据A值高低可作抗体水平强、中、弱的粗略评估。
